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進(jìn)行了酵母雙雜交篩選實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示 MdMPK3 可以與 MdWRKY17 相互作用（圖 C），并且通過 BiFC、Co-IP 得以證實(shí)（圖 D-E）。MdMPK3 的激酶活性水平在炭疽菌***后也***上升（圖 B）。進(jìn)一步的 BiFC 和 Co-IP 表明，MdMEK4 可以與 MdMPK3 相互作用（圖 F-G）。體外激酶試驗(yàn)表明，MdWRKY17 能夠被MdMEK4- MdMPK3 級聯(lián)磷酸化（圖 H）。綜上，MdMEK4-MdMPK3 級聯(lián)磷酸化 MdWRKY17。與對照相比，MdWRKY17過表達(dá)植株中水楊酸含量降低，而RNAiMdWRKY17植株中水楊酸含量升高（圖A）。

蛋白被泛素化后（即蛋白上結(jié)合了泛素），意味著將要被運(yùn)往蛋白酶體降解，一般用于降解細(xì)胞內(nèi)老弱病殘蛋白，再回收利用。同時也被用于排除異己，抵御外敵。該過程需要一系列酶介導(dǎo)：泛素***酶（E1）、泛素偶聯(lián)酶（E2）和泛素E3連接酶（E3）。其中E3是起特異性識別作用的，即決定誰該被降解，不能把好同志降解掉。所以E3基因很多，植物中主要有四種類型：HECT、RING、U-box和CRLs。其中CRLs是植物中含量**豐富的E3連接酶。本研究中，通過酵母雙雜交篩選到的標(biāo)題蛋白MdBT2，整好是CRLs亞家族之一。因此作者推測MdBT2可能在與ApNMV1a結(jié)合后，起到了促進(jìn)其泛素化和降解的作用。酵母單雙雜交服務(wù)促銷季技術(shù)服務(wù)。

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