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基于免疫細(xì)胞來(lái)源的外泌體能夠介導(dǎo)和調(diào)節(jié)機(jī)體對(duì)中流的免疫反應(yīng)，外泌體在中流免疫zhiliao方面的潛力受到廣fan關(guān)注。其中樹枝狀細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體包含大量的MHC-多肽復(fù)合物和免疫刺激相關(guān)的分子，能夠激huo相關(guān)的T細(xì)胞，介導(dǎo)體內(nèi)抗中流應(yīng)答，在多個(gè)臨床試驗(yàn)中表現(xiàn)出良好的抗中流療效。Morse等考察了樹枝狀細(xì)胞外泌體對(duì)非小細(xì)胞肺ai患者的療效。結(jié)果表明，患者對(duì)樹枝狀細(xì)胞外泌體耐受性良好，1/3患者表現(xiàn)出了對(duì)樹枝狀細(xì)胞外泌體的T細(xì)胞響應(yīng)，2/4患者自然殺傷細(xì)胞活性得以激huo。外泌體可釋放轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β（TGF-β）ji活TGF-β信號(hào)通路，促進(jìn)中流的轉(zhuǎn)移。河北外泌體NTA

為獲得外泌體的大小、濃度、形態(tài)及蛋白質(zhì)組成等信息，可以通過(guò)電鏡、動(dòng)態(tài)光散射、納米顆粒跟蹤分析儀、蛋白質(zhì)免疫印跡、酶聯(lián)免疫吸附法、流式細(xì)胞儀等對(duì)外泌體進(jìn)行表征。通過(guò)電鏡可獲得外泌體的形態(tài)信息，不同類型的顯微鏡由于操作環(huán)境不同，得到的外泌體形態(tài)存在差異。例如，在掃描電鏡、透射電鏡和原子力顯微鏡中，外泌體呈現(xiàn)囊泡獨(dú)有的茶托形，可能由于樣品在固定或染色過(guò)程中極度脫水，導(dǎo)致外泌體塌陷所致。與之相反，在冷凍電鏡中外泌體呈現(xiàn)圓形，由于不會(huì)脫水變性，所得的外泌體形態(tài)可能更加接近囊泡的真實(shí)狀態(tài)。另外，由于透射電鏡和原子力顯微鏡具有較高分辨率，也能夠提供外泌體磷脂雙分子層厚度、粒徑分布等信息。河北植物葉組織外泌體提取外泌體表面具有特定的蛋白標(biāo)志物，其內(nèi)含物也極為豐富。

在運(yùn)輸DOX的研究中，Wei等選擇了已經(jīng)在臨床上使用的未成熟的樹突細(xì)胞作為母代細(xì)胞，通過(guò)化學(xué)轉(zhuǎn)染使其分泌的外泌體表面含有Lamp2b，這種蛋白可以與αv整合蛋白特異性iRGD肽結(jié)合，使外泌體對(duì)DOX的運(yùn)輸具有靶向性。將對(duì)iRGD肽靶向的外泌體和未經(jīng)靶向性處理的外泌體用DiR染料標(biāo)記，并分別靜脈注射入移植了人乳腺ai細(xì)胞的小鼠體內(nèi)，觀察到靶向的外泌體在注射30min后已經(jīng)出現(xiàn)在中流組織處，在注射2h后外泌體的含量高，而未經(jīng)靶向性處理的外泌體在注射后主要集中在肝臟，幾乎很少到達(dá)中流組織處，說(shuō)明對(duì)iRGD肽靶向的外泌體具有很好的靶向性。

外泌體(exosomes)是一類由細(xì)胞分泌到胞外的囊泡。與其他兩種胞外囊泡(微囊泡和凋亡小體)相比，外泌體在產(chǎn)生方式、尺寸、密度和內(nèi)容物等方面存在明顯差異。不同于微囊泡“出芽”的形成方式，外泌體主要通過(guò)胞吐過(guò)程釋放至細(xì)胞外:首先細(xì)胞膜向內(nèi)凹陷形成早期核內(nèi)體(earlyendosomes)，早期核內(nèi)體進(jìn)一步內(nèi)陷形成多泡體(multivesicularbodies，MVBs)，其中一部分多泡體與溶酶體(lysosome)融合，進(jìn)而降解;另一部分與細(xì)胞膜融合，將其內(nèi)部所包含的囊泡釋放至胞外，即為外泌體。外泌體具有獨(dú)特的物理化學(xué)性質(zhì)，其直徑為30～200nm，密度為1.13～1.19g/mL，組成包括細(xì)胞來(lái)源相關(guān)的脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、RNA、DNA等物質(zhì)，在其表面連接有大量的糖鏈，如甘露糖、聚乳糖胺和α2，6-唾液酸等。干細(xì)胞外泌體對(duì)多種類型的免疫細(xì)胞均具有免疫調(diào)節(jié)作用。

細(xì)胞分泌外泌體的過(guò)程一般分為三個(gè)階段: (1) 質(zhì)膜內(nèi)陷, 形成早期內(nèi)吞小泡; (2) 內(nèi)吞小泡向內(nèi)萌發(fā)成熟, 形成多囊泡體; (3) 多囊泡體與質(zhì)膜融合, 并釋放出囊泡內(nèi)容物, 形成外泌體。外泌體具有獨(dú)特的理化性質(zhì), 其密度為1.13~1.19 g/mL, 由平均厚度小于5 nm的雙層脂膜所包裹, 具有典型杯狀形態(tài), 呈現(xiàn)為扁平球形。外泌體表面富含多糖鏈, 其質(zhì)膜主要由溶血磷脂酸、磷脂酰絲氨酸、膽固醇、神經(jīng)酰胺和鞘磷脂構(gòu)成, 另有與細(xì)胞來(lái)源相關(guān)的部分特殊脂類。外泌體可攜帶蛋白質(zhì)、核酸和脂質(zhì)等生物活性大分子, 其中主要為蛋白質(zhì), 且大部分蛋白為所有來(lái)源外泌體所共有, 只有小部分與其來(lái)源有關(guān), 為其分泌細(xì)胞的特有蛋白, 能夠反映分泌細(xì)胞的類型和生理病理狀態(tài)。除此之外, 外泌體可攜帶大量mRNA和miRNA等核酸, 并將其運(yùn)輸?shù)桨屑?xì)胞, 發(fā)揮相應(yīng)的生物學(xué)功能。外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合，進(jìn)而喚醒靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。浙江植物莖組織外泌體

微流控技術(shù)是利用外泌體在微量體上的物理和生物化學(xué)特性來(lái)進(jìn)行快速有效地分離，省時(shí)高效。河北外泌體NTA

外泌體作為疾病診斷的標(biāo)志物具有其獨(dú)特優(yōu)勢(shì):(1)與正常細(xì)胞相比，病變細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體在分泌量和內(nèi)容物方面存在明顯差異。病變的細(xì)胞和組織能夠產(chǎn)生更多外泌體。(2)由于特殊的生成方式，外泌體的組成不同于來(lái)源細(xì)胞。其內(nèi)包含的一些特異性蛋白質(zhì)能夠揭示外泌體的起源、結(jié)構(gòu)和運(yùn)輸方式，有利于深入了解外泌體的產(chǎn)生機(jī)制。(3)病變細(xì)胞分泌的外泌體通過(guò)胞吐的過(guò)程進(jìn)入血液、尿液等體液，囊泡狀結(jié)構(gòu)能夠保護(hù)外泌體內(nèi)部生物分子不受體液中蛋白酶、磷酸酶、核酸酶等干擾，有利于保持其結(jié)構(gòu)完整和生物活性，通過(guò)對(duì)此類體液進(jìn)行分析可以實(shí)現(xiàn)疾病的無(wú)創(chuàng)或微創(chuàng)檢測(cè)。河北外泌體NTA

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