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選擇三種來(lái)源（褐藻膠、果膠、殼聚糖）的不同分子量大小的九種寡糖片段進(jìn)行研究。利用植物的促生長(zhǎng)和抗逆指標(biāo)進(jìn)行篩選，獲得了一種既具 有明顯的促生長(zhǎng)作用，又具有抗逆作用的寡糖片段，為褐藻寡糖 HZ3，經(jīng)過(guò)質(zhì)譜分析，其組分是以二、三糖為主的含有少量四糖和五糖的寡糖混合物。本研究第二部分是利用植物的植株、愈傷組織和懸浮細(xì)胞為材料，建立起寡糖促生長(zhǎng)的綜合性的驗(yàn)證方法。對(duì)植株分別選擇了雙子葉植物豌豆和單子葉植物玉米，利用寡糖浸種，分別考察在種子萌發(fā)與幼苗生長(zhǎng)初期其體內(nèi)蛋白酶、淀粉酶和激S含量的變化，結(jié)合種子與植株的生長(zhǎng)指標(biāo)，探討寡糖的促生長(zhǎng)作用機(jī)理。褐藻寡糖是一種由褐藻多糖（褐藻膠）經(jīng)過(guò)裂合酶降解而獲得的小分子量片段。遼寧褐藻寡糖生物調(diào)節(jié)

褐藻寡糖對(duì)煙C葉片細(xì)胞膜低溫?fù)p傷程度的影響 丙二醛MDA含量和細(xì)胞電滲率大小是植物細(xì)胞膜損傷程度的重要指標(biāo) ,在低溫環(huán)境中 ,植物受到損傷后,細(xì)胞膜受到破壞, MDA和細(xì)胞電滲率都有不同程度升高 。經(jīng)過(guò)低溫脅迫6h后, 水處理(ADO 濃度為 0)組MDA含量和電滲率分別增加了4 .9倍和1 .5倍 ,隨著低溫脅迫時(shí)間延長(zhǎng),MDA和電滲率仍繼續(xù)增加, 這是因?yàn)殡m然煙C葉面覆蓋有水層, 能夠減小葉面溫差變化 ,減輕低溫對(duì)葉片傷害,但并不能完全阻止凍害發(fā)生, 因此煙C胞內(nèi)物質(zhì)不斷滲漏, 隨低溫處理時(shí)間延長(zhǎng)細(xì)胞損傷不斷加劇 。噴施寡糖后進(jìn)行低溫脅迫, 0 .05 %～ 0 .30 %ADO 處理組 MDA 和電滲率相比同一時(shí)刻水處理組都有不 同程度下降 ,說(shuō)明能夠減少細(xì)胞膜損傷, 降低胞內(nèi)物質(zhì) 外滲, 但經(jīng) 0 .10 %ADO 處理的煙C在 48 h 時(shí) MDA 和 細(xì)胞電滲率明顯升高。經(jīng)1 .00 %ADO 處理后進(jìn)行低溫脅迫 ,短時(shí)間內(nèi) MDA 含量和電滲率都劇烈增加, 隨著時(shí)間延長(zhǎng)不斷上升 ,說(shuō)明此濃度ADO加重了煙C葉片傷害 ,可能是由于較高濃度 ADO 溶液對(duì)煙C葉片形成較強(qiáng)滲透勢(shì), 造成細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)滲出 ,破壞了細(xì)胞正常 結(jié)構(gòu) ,在低溫下更加劇了煙C葉片損傷。 廣西褐藻寡糖生物調(diào)節(jié)褐藻膠寡糖對(duì)豌豆種子萌發(fā)和幼苗生長(zhǎng)有促進(jìn)作用，種子發(fā)芽率升高，幼苗高度、根長(zhǎng)、生物均有增加。

褐藻膠寡糖能夠促使大麥克服休眠、激發(fā)大麥發(fā)芽、加速大麥發(fā)芽速率和提高發(fā)芽能力，這說(shuō)明褐藻膠寡糖能夠促進(jìn)谷物種子萌發(fā)的激發(fā)子。本研究結(jié)果表明，在大麥發(fā)芽過(guò)程中，通過(guò)在浸麥過(guò)程中添加褐藻膠寡糖能促進(jìn)水解酶活力的提高，進(jìn)而使麥芽的溶解性能顯著提高，縮短了制麥周期，同時(shí)顯著提高了麥芽質(zhì)量和麥汁得率。生物活性寡糖作為外源激發(fā)子對(duì)種子萌發(fā)、植物生長(zhǎng)及防御反應(yīng)具有一定的調(diào)節(jié)功能。這一結(jié)果可能是由于褐藻膠寡糖作為帶負(fù)電的生物活性寡糖，被植物吸收后，在質(zhì)外體空間與Ｃａ２＋結(jié)合，形成糖－鈣復(fù)合物，打破植物體內(nèi)的鈣穩(wěn)定平衡，使胞質(zhì)Ｃａ２＋濃度增加，從而激發(fā)種子萌發(fā)相關(guān)酶類。此外，還可能通過(guò)調(diào)控內(nèi)源激S水平及其平衡來(lái)激發(fā)種子細(xì)胞水解酶活性，終表現(xiàn)為大麥發(fā)芽速率的增加和麥芽品質(zhì)的改善。褐藻膠寡糖具有獨(dú)特的化學(xué)結(jié)構(gòu)，其在細(xì)胞表面的接受蛋白、信號(hào)傳導(dǎo)途徑及下游相關(guān)基因表達(dá)的分子機(jī)制還不清楚，有待進(jìn)一步深入研究。

利用高效安全無(wú)污染的生物制劑褐藻寡糖外源噴施黃瓜幼苗，將黃瓜幼 苗分為噴施組和未噴施組；再配制不同濃度（0.05%、0.1%、0.2%、0.3%、0.5%、） 的褐藻寡糖溶液噴施黃瓜幼苗。對(duì)黃瓜幼苗的生長(zhǎng)指標(biāo)，抗氧化酶活性及抗氧化 酶相關(guān)基因、WRKY 基因家族對(duì)褐藻寡糖應(yīng)答情況進(jìn)行測(cè)定。旨在探究不同濃 度褐藻寡糖對(duì)黃瓜的生長(zhǎng)、產(chǎn)量及品質(zhì)的影響，對(duì)褐藻寡糖對(duì)作物促進(jìn)作用的機(jī) 理進(jìn)行了初步研究，探索 WRKY 轉(zhuǎn)錄因子和褐藻寡糖在黃瓜生長(zhǎng)中的重要功能 及作用機(jī)制。褐藻寡糖促進(jìn)黃瓜幼苗生長(zhǎng)發(fā)育，主要表現(xiàn)為生物量（株高、莖粗）隨 著濃度的升高呈增長(zhǎng)趨勢(shì)，葉片數(shù)增多。與未噴施組相比，噴施組生物量均有所 改善。對(duì)果期產(chǎn)量也有所提高。寡糖作為信號(hào)分子與作物細(xì)胞結(jié)合并相互作用，引起作物的相關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。

AOS對(duì)PVX、TMV有較好的防治效果分別在噴施AOS前24h和噴施AOS后24h接種帶有GFP標(biāo)簽的PVX。發(fā)病后,在紫外燈下觀察綠色熒光并檢測(cè)病毒積累量。結(jié)果顯示先噴施AOS后接種PVX,5d后,30.6%系統(tǒng)葉片出現(xiàn)熒光,而噴施ddH2O的本氏煙,85.7%上部葉片出現(xiàn)熒光;噴施AOS的本氏煙中病毒的積累量也明顯低于對(duì)照。先接種PVX后噴施AOS,與噴施ddH2O的本氏煙系統(tǒng)葉片的熒光強(qiáng)度并無(wú)明顯區(qū)別,本氏煙中病毒的積累量也無(wú)明顯差異。以上結(jié)果說(shuō)明,AOS對(duì)病毒有明顯的預(yù)防效果。用不同濃度的AOS處理本氏煙后接種PVX,檢測(cè)抗病效果,結(jié)果顯示在AOS濃度為100μg/mL時(shí),其抗病效果好。之后,采用100μg/mL的AOS噴施本氏煙后,接種煙C花葉病毒（TMV）,發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組相比,AOS處理的葉片上熒光強(qiáng)度也明顯減弱,TMV的積累量也明顯降低,表明AOS也可以增強(qiáng)植物對(duì)TMV的抗性。以上結(jié)果說(shuō)明,AOS增強(qiáng)植物對(duì)病毒的抗性具有普遍性。褐藻寡糖羧基的酯化度在植物細(xì)胞誘導(dǎo)反應(yīng)中也發(fā)揮了作用將其開(kāi)發(fā)為具有獨(dú)特藥理療效和具有保健功能的食品。福建褐藻寡糖技術(shù)要求

褐藻寡糖可以誘導(dǎo)植物氣孔關(guān)閉，有效抑制病原菌侵染宿主。遼寧褐藻寡糖生物調(diào)節(jié)

褐藻寡糖對(duì)煙C葉片葉綠素含量的影響葉綠素是高等植物進(jìn)行光合作用的主要成分,葉綠素?fù)p失或者破壞會(huì)嚴(yán)重影響植物生長(zhǎng)發(fā)育進(jìn)程,在某種程度上葉綠素含量多少表征著植物健康程度。圖3和圖4是煙C葉片中葉綠素a和葉綠素b在噴施褐藻寡糖后的變化結(jié)果。研究發(fā)現(xiàn):經(jīng)過(guò)6h低溫脅迫,水處理組葉綠素a和b含量分別下降了23.9%和6.0%,隨著時(shí)間延長(zhǎng),2種葉綠素含量繼續(xù)減少,48h后分別只有對(duì)照的51.2%和78.3%,說(shuō)明在低溫脅迫下,水處理組葉綠素受到低溫?fù)p傷破壞,且隨著時(shí)間延長(zhǎng),破壞不斷加劇。在2種葉綠素中,葉綠素a比葉綠素b更容易受到低溫破壞。噴施了0.05%～0.30%褐藻寡糖后進(jìn)行低溫脅迫,煙C葉片葉綠素a和b含量比水處理組有不同程度升高,表明此濃度范圍內(nèi)寡糖能夠減輕低溫對(duì)葉綠素的損傷,其中以0.20%寡糖溶液效果明顯,但0.10%褐藻寡糖處理組在48h時(shí)葉綠素a和b的含量都有較大幅度下降,表明葉綠素受到破壞損傷;高濃度1.00%褐藻寡糖對(duì)煙C起破壞作用,與對(duì)照組相比,葉綠素a和b含量都有較大幅度減少,隨時(shí)間延長(zhǎng),二者含量繼續(xù)降低,表明煙C葉綠素?fù)p傷加劇。遼寧褐藻寡糖生物調(diào)節(jié)

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