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●如果蛋白質(zhì)已經(jīng)轉(zhuǎn)移到已經(jīng)干燥的PVDF膜上，請(qǐng)用100％重新潤(rùn)濕印跡甲醇，然后在組裝前用蒸餾水沖洗。如果蛋白質(zhì)已轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜干燥后，用蒸餾水重新潤(rùn)濕印跡。，對(duì)于大多數(shù)應(yīng)用和大多數(shù)抗體而言，0.5％的脫脂/低脂干奶溶液可以提供足夠的膜的阻塞。注意：請(qǐng)勿使用濃度高于0.5％的干奶，因?yàn)樗赡軙?huì)導(dǎo)致吸墨紙架堵塞膜。如果使用其他封閉溶液，請(qǐng)參閱表5了解兼容性和推薦濃度?！裨谙礈?，封閉和抗體緩沖液中始終使用0.1％Tween820表面活性劑。這將減少溶液的表面張力，并確保孵育過

等待5至8秒鐘，直到框架完全空了。真空運(yùn)行連續(xù)添加30mL洗滌緩沖液（對(duì)于MultiBlot為15mL）。重復(fù)洗滌步驟3次（共3次）4次洗滌）。12.關(guān)閉真空，然后從框架上取下吸墨架。從污點(diǎn)固定器中取出污點(diǎn)，并與適當(dāng)?shù)臋z測(cè)試劑。如果使用了MultiBlot孔空白，則卸下并清洗。 擴(kuò)展一級(jí)抗體孵育：一小時(shí)至過夜1.執(zhí)行《通用議定書》的步驟1至5。2.加入2.5mL（對(duì)于MultiBlot），5mL（對(duì)于Miniblot）或10mL（對(duì)于Midiblot）1X一抗（濃縮液）通常在只在運(yùn)行時(shí)將毛坯用于堵塞空腔印跡SNAPi.d.@2.0迷你吸盤座接受多達(dá)7.5倍8.4厘米墨跡SNAP2BHMN0100SNAPi.d.02.0Midi吸筆架接受多達(dá)8.5x13.5厘米的污點(diǎn)。上海WB實(shí)驗(yàn)加速器的供應(yīng)商。

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