緩沖溶液是許多生化反應(yīng)、生產(chǎn)、實驗過程中的重要溶液,對穩(wěn)定溶液的酸堿度有重要的影響。本文以**常見的幾種緩沖體系——磷酸鹽緩沖溶液、硼酸鹽緩沖溶液、三羥甲基氨基甲烷(簡稱Tris)-HCl緩沖溶液、羥乙基哌嗪乙磺酸(供注射用)(簡稱HEPES)緩沖溶液為例,介紹緩沖溶液的組成、緩沖原理及其在生物化學(xué)方面的應(yīng)用。對于絕大多數(shù)生物制劑(如疫苗、抗體、ADC偶聯(lián)藥物、脂質(zhì)體等)而言,實驗操作、實際生產(chǎn)以及生物體內(nèi)的生化反應(yīng)等都需要在特定的pH值范圍內(nèi)才能正常有效地進(jìn)行,從而得到準(zhǔn)確的實驗結(jié)論或發(fā)揮比較好的***效果。在這些反應(yīng)過程中酸堿緩沖溶液經(jīng)常發(fā)揮著非常重要的作用。如人體血漿中存在NaHCO3-H2CO3、蛋白質(zhì)鈉鹽-蛋白質(zhì)、氧合血紅蛋白鉀鹽-氧合血紅蛋白等緩沖對構(gòu)成血漿的酸堿緩沖系統(tǒng),以維持正常人血漿的pH值在7.35~7.45。若血漿pH值低于7.35或者高于7.45則分別會引起酸中毒和堿中毒,危及生命。國內(nèi)艾偉拓注射用HEPES已登記?黑龍江備案登記號HEPES批發(fā)

生物緩沖劑HEPES粉末事實證明,HEPES優(yōu)于碳酸鹽緩沖液等其他緩沖液,可以避免二氧化碳釋放導(dǎo)致細(xì)胞微細(xì)化生長,因此在細(xì)胞培養(yǎng)中頻繁使用。HEPES的PH值隨溫度下降而下降,但磷酸鹽與碳酸氫鹽緩沖液的解離常數(shù)pK幾乎不隨溫度變化。HEPES的行為與水相似,溫度降低解離常數(shù)降低,HEPES可用于維持酶在低溫下的結(jié)構(gòu)和功能。HEPES為白色結(jié)晶粉末,純度高、質(zhì)量好,主要含量在99.50%以上,鐵離子在5ppm以下,硫酸鹽在0.05%以下,重金屬殘留量在10ppm以下。提供少量試用樣品粉末,可自行配置于溶液中檢測使用。上海輔料HEPES生產(chǎn)廠家GMP條件下生產(chǎn)注射級HEPES!

(1)hepes緩沖液可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中,再過濾除菌.每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES,待溶后用lNNaOH調(diào)pH至7.2,濾過除菌后使用.此時HEPES的使用濃度為10mmol/L.(2)亦可配成100x貯存液(lmol/L),使用前取99ml培養(yǎng)液加入lml貯存液,**終應(yīng)用濃度仍為10mmol/L。lmol/L(100x)hepes緩沖液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml雙蒸水中,用lNNaOH調(diào)pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,過濾除菌,分裝小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存.作者:知乎用戶0mmkBe
緩沖溶液(德語:Pufferl?sung;英語:buffersolution;法語:solutiontampon)指由“弱酸及其共軛堿之鹽類”或“弱堿及其共軛酸之鹽類”所組成的緩沖對配制的,能夠在加入一定量其他物質(zhì)時減緩pH改變的溶液。前述定義中之所以要兩種成對物質(zhì),是因為反應(yīng)可以同時朝向酸或堿來緩沖,舉例醋酸與醋酸鈉的混合溶液就是緩沖溶液。若加鹽酸,pH不會下降太快,因為鹽酸會跟醋酸鈉反應(yīng),生成醋酸。相反,若加氫氧化鈉,pH也不會增加太快,因為氫氧化鈉會跟醋酸反應(yīng),生成醋酸鈉。在許多化學(xué)反應(yīng)中,緩沖溶液被用于使溶液的pH值保持恒定。緩沖溶液對生命的產(chǎn)生與進(jìn)化具有重要意義,因為多數(shù)生物都只能在一定pH范圍內(nèi)生長,例如血液就是一種緩沖溶液。國內(nèi)AVT穩(wěn)定供貨HEPES!

這是維基百科對于生物緩沖液的定義和解釋,在這里我們不做過多解釋。生物緩沖液有很多種,這里我們只講常見的幾種,從它們的化學(xué)性質(zhì),注意事項,具體用途到**重要的,如何確定哪種緩沖液**適合你的實驗。三羥甲基氨基甲烷Tris,CAS是77-86-1,它是應(yīng)用*****的緩沖液,其溶液呈弱堿性,25℃下的pKa為8.06,pH緩沖范圍:7.0-9.0,廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、分子生物學(xué)、涂料等領(lǐng)域。儲存方法:Tris緩沖液容易吸收空氣中的二氧化碳,儲存時需要密封。三羥甲基氨基甲烷鹽酸Tris-HCl,CAS是1185-53-1,是Tris的鹽酸鹽形式,其溶液呈酸性。艾偉拓穩(wěn)定供貨注射級HEPES。浙江高純HEPES醫(yī)院采購
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HEPES緩沖溶液的制備方法:一.500ml1MHEPES,pH=7.0Stocksolution的制備將19.15ghepes溶解在400ml蒸餾水中,加入0.5~1M的NaOH水溶液,調(diào)整至至少所需的pH(HePeS的有效ph范圍為6.8~8.2),然后用蒸餾水定容至500ml,在4保存。二.加入少量鹽的HEPESBuffer***(500ml)用HEPES6.5g、NaCl8.0g、Na2HPO4.7H2O0.198g、0.5MNaOH水溶液調(diào)節(jié)pH,*后定容。.2HEPES緩沖鹽溶液的制備將1.6gNaCl、0.074gKCl、0.027gNa2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucanordextran)和1gHEPES溶解在90ml蒸餾水中,用0.5MNaOH調(diào)節(jié)至所需的pH值,再用蒸餾水定容至100ml即可。黑龍江備案登記號HEPES批發(fā)
【關(guān)于我們】艾偉拓(上海)醫(yī)藥科技有限公司AVT.是國內(nèi)一家專營磷脂類藥用輔料的科技公司,旗下產(chǎn)品覆蓋天然磷脂、合成磷脂、功能化磷脂等細(xì)分領(lǐng)域,并提供諸如油酸、油酸鈉、膽固醇等相關(guān)輔料產(chǎn)品。A.V.T.專注脂質(zhì)體、脂肪乳、微納米靶向制劑等遞藥體系,是國內(nèi)藥企、高校、研究所等單位主要磷脂供應(yīng)商。
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